Nghiên cứu khả năng nhân giống cây giảo cổ lam (Gynostemma pentaphyllum Thunb) bằng phương pháp In vitro

Giảo cổ lam là một cây thuốc quý có lam chứa hơn 100 loại Saponin trong đó có nhiều cấu trúc giống như Saponin của nhân sâm và tam thất. Nghiên cứu nhân giống in vitro cây Giảo Cổ Lam (Gynostemma pentaphyllum) được thực hiện với môi trường MS - 1962 cải tiến; độ pH 5,8; khử trùng hơi ở nhiệt độ 121⁰C trong 18 phút. Nhiệt độ phòng nuôi cấy 25⁰C; ẩm độ 65%, cường độ chiếu sáng 2000 lux, 16 giờ sáng/8 giờ tối. Kết quả nghiên cứu cho thấy đoạn thân non, bánh tẻ được khử trùng bằng dung dịch HgCl₂ 0,1% trong thời gian 5 phút cho tỷ lệ mẫu sống cao đạt 86,67%. Mẫu sau khi vô trùng cho tỷ lệ tái sinh phôi cao nhất trong môi trườn MS cải tiến đạt tỷ lệ tái sinh 100%, Ở giai đoạn nhân nhanh chúng tôi tiến hành thử nghiệm trên môi trường MS bổ sung  BA, Kinetine và NAA. Kết quả cho thấy môi trường MS bổ sung Kinetine với nồng độ 0,4mg/L và BA 0,5mg/L cho hệ số nhân nhanh chồi đạt 4,36 lần, chồi nhỏ, xanh đậm sau 4 tuần nuôi cấy. Ở giai đoạn ra rễ chúng tôi sử dụng môi trường MS kết hợp với chất kích thích sinh trưởng IBA từ 0,1 – 0,4mg/L. Kết quả ở nồng độ IBA ở nồng độ  0,1mg/L cho tỷ lệ ra rễ của cây Giảo Cổ Lam đạt 100%, số rễ /chồi đạt 4,16 rễ, rễ đạt tiêu chuẩn ra cây.Giảo cổ lam là một cây thuốc quý có lam chứa hơn 100 loại Saponin trong đó có nhiều cấu trúc giống như Saponin của nhân sâm và tam thất. Nghiên cứu nhân giống in vitro cây Giảo Cổ Lam (Gynostemma pentaphyllum) được thực hiện với môi trường MS - 1962 cải tiến; độ pH 5,8; khử trùng hơi ở nhiệt độ 121⁰C trong 18 phút. Nhiệt độ phòng nuôi cấy 25⁰C; ẩm độ 65%, cường độ chiếu sáng 2000 lux, 16 giờ sáng/8 giờ tối. Kết quả nghiên cứu cho thấy đoạn thân non, bánh tẻ được khử trùng bằng dung dịch HgCl₂ 0,1% trong thời gian 5 phút cho tỷ lệ mẫu sống cao đạt 86,67%. Mẫu sau khi vô trùng cho tỷ lệ tái sinh phôi cao nhất trong môi trườn MS cải tiến đạt tỷ lệ tái sinh 100%, Ở giai đoạn nhân nhanh chúng tôi tiến hành thử nghiệm trên môi trường MS bổ sung  BA, Kinetine và NAA. Kết quả cho thấy môi trường MS bổ sung Kinetine với nồng độ 0,4mg/L và BA 0,5mg/L cho hệ số nhân nhanh chồi đạt 4,36 lần, chồi nhỏ, xanh đậm sau 4 tuần nuôi cấy. Ở giai đoạn ra rễ chúng tôi sử dụng môi trường MS kết hợp với chất kích thích sinh trưởng IBA từ 0,1 – 0,4mg/L. Kết quả ở nồng độ IBA ở nồng độ  0,1mg/L cho tỷ lệ ra rễ của cây Giảo Cổ Lam đạt 100%, số rễ /chồi đạt 4,16 rễ, rễ đạt tiêu chuẩn ra cây.

Hình 1. Chồi Giảo cổ lam trên môi trường MS cơ bản có bổ sung Kinetin ở giai đoạn tái sinh.

a. Đối chứng: chồi mập, xanh. b. Kinetin 0,2mg/l: chồi mập, xanh. c. Kinetin 0,4mg/l: chồi mập, xanh. d. Kinetin 0,5mg/l: chồi nhỏ, xanh. e. Kinetin 1,5mg/l: chồi nhỏ, xanh.

Hình 2. Chồi Giảo cổ lam trên môi trường cơ bản MS có bổ sung hàm lượng Kinetin và BA ở giai đoạn nhân nhanh.

a, Đối chứng chồi nhỏ, xanh. b, Kinetin 0,5mg/l và 0,1mg/l BA chồi mập, xanh. c, Kinetin 0,5mg/l và 0,3mg/l BA chồi mập, xanh. d, Kinetin 0,5mg/l và 0,5mg/l BA chồi nhỏ, xanh. e, Kinetin 0,5mg/l và 1mg/l BA chồi nhỏ, xanh.

Hình 3. Chồi Giảo cổ lam trên môi trường cơ bản MS có bổ sung hàm lượng Kinetin và NAA ở giai đoạn nhân nhanh.

a, Đối chứng chồi nhỏ, xanh. b, Kinetin 0,5mg/l và 0,05mg/l NAA chồi mập, xanh. c, Kinetin 0,5mg/l và 0,1mg/l NAA chồi nhỏ, xanh. d, Kinetin 0,5mg/l và 0,2mg/l NAA chồi nhỏ, xanh. e, Kinetin 0,5mg/l và 0,5mg/l NAA chồi nhỏ, xanh.

Hình 4. Rễ Giảo cổ lam trên môi trường MS có bổ sung 0,1mg/l IBA

a, Đối chứng rễ nhỏ, ngắn. b, IBA 0,1mg/l rễ khỏe, dài. c, IBA 0,2mg/l rễ khỏe, dài. d, IBA 0,3mg/l rễ khỏe, dài.e, IBA 0,4mg/l rễ nhỏ, ngắn.

Trên đây là những kết quả nghiên cứu của nhóm tác giả: Bùi Đình Lãm, Nguyễn Thị Tình, Nguyễn Văn Duy, Nguyễn Văn Bảo, Lã Văn Hiền, Ngô Xuân Bình trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên được đăng tải trên tạp chí Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn số ra tháng 11 năm 2015 số trang: 249-256

Tin bài và Đăng tin: Bùi Đình Lãm